常用玻璃器材的準備

微生物實驗室內應用的玻璃器材種類甚多，如吸管、試管、燒瓶、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)瓶、毛細吸管、載玻片、蓋玻片等，在采購時應注意各種玻璃器材的規(guī)格和質量，一般要求能耐受多次高熱滅菌，且以中性為宜。玻璃器皿用前要經過刷洗處理，使之干燥清潔，有的需要無菌處理。對于每個從事微生物工作的人員應熟悉和掌握各種玻璃器皿用前用后的處理。現(xiàn)將玻璃器皿的種類及其準備列述如下：
一、常用玻璃器皿的種類及要求
（一）試管  用于細菌及血清學試驗的試管應較堅厚，以便加塞不致破裂。常用的規(guī)格有：
1.2～3×65mm，  用于環(huán)狀沉淀試驗；
2.11～13×100mm，用于血清學反應及生化試驗等；
3.15×150mm，用于分裝5～10ml的培養(yǎng)基及菌種傳代等；
4.25×200mm，用于特殊試驗或裝滅菌滴管等。
（二）三角燒瓶  底大口小，放置平穩(wěn)，便于加塞，多用于盛培養(yǎng)基、配制溶液等。常用的規(guī)格有50、100、150、250、500、1000、2000、3000、5000ml等。
（三）培養(yǎng)皿為硬質玻璃雙碟，常用于分離培養(yǎng)。蓋與底的大小應合適。蓋的高度較底稍低，底部平面應特別平整。常用的規(guī)格（以皿蓋直徑計）有：90mm，75mm，60mm等。
（四）吸管  用于吸取少量液體。常用的吸管有兩種；一種為無刻度的毛細吸管；另一種為有刻度吸管。管壁有精細的刻度。一般長為25厘米。常用的容量為0.2、0.5、1.0、2.0、5.0及10ml。
（五）量簡、量杯  用于液體的測量。常用規(guī)格為：10、20、25、50、100、200、500、1000及2000ml。
（六）燒杯  常用的規(guī)格50～3000ml容量，供盛液體或煮沸用。
（七）載玻片及蓋玻片，載玻片供作涂片用，常用的規(guī)格為75×25mm，厚度為1～2mm。另有凹玻片可供作懸滴標本及作血清學試驗用。蓋玻片為極薄的玻片，用于標本封閉及懸滴標本等。有圓形的，直徑18mm；方形的18×18或22×22mm；長方形的22×36mm等數(shù)種。
（八）離心管  常用規(guī)格有10、15、100及、250ml等數(shù)種，供分離沉淀用。
（九）試劑瓶  有磨紗口，有蓋，分廣口和小口兩種，容量自30～1000ml不等，視需要量選擇使用。分棕色、無色兩種，為貯藏藥品和試劑用，凡避光等藥品試劑均宜用棕色瓶。
（十）玻璃缸  缸內常頸置石炭酸或來蘇兒等清毒劑，以備放置用過的破片、吸管等。
（十一）染色缸  有方形和圓形兩種，可放載玻片6～10片，供細菌、血液及組織切片標本染色用。
（十二）滴瓶  有橡皮帽式管滴和玻塞式，分白色和棕色，容量有30ml和60ml等，供貯存試劑及染色液用。
（十三）漏斗  分短頸和長頸式兩種。漏斗直徑大小不等，視需要而定。分裝溶液或上墊濾紙或紗布、棉花作過濾雜質用。
（十四）注射器  有0．25ml、0．5ml、1ml、2ml、5ml、10ml、20ml、50ml和100ml等。供接種試驗動物和采血用。
（十五）下曰瓶  有龍頭和無龍頭兩種。容量有2500～20000ml不等。存放蒸餾水或常用消毒藥液，也可作細菌涂片染色時沖洗染液用。
除上述外，還有發(fā)酵管、玻璃棒、酒精燈、玻璃珠以及蒸餾水瓶等玻璃器材。
二、一般玻璃器皿的準備
（一）新購入玻璃器皿的處理，新購玻璃器皿常附有游離堿質，不可直接使用，應先在2％鹽酸溶液中浸泡數(shù)小時，以中和堿性，然后用肥皂水及洗衣粉洗刷玻璃器皿之內外，再以清水反復沖洗數(shù)次，以除去遺留的酸質，最后用蒸餾水沖洗。
（二）用后玻璃器皿的處理，凡被病原微生物污過的玻璃器皿，在洗滌前必須進行嚴格的消毒后，再行處理，其方法如下：
1．一般玻璃器皿（如平皿、試管、燒杯、燒瓶等）均可置高壓滅菌器內15磅20～30分鐘滅菌。隨即趁熱將內容物倒凈，用溫水沖洗后，再用5％肥皂水煮沸5分鐘，然后按新購入產品的方法同樣處理。
2．吸管類使用后，投入2％來蘇兒或5％石炭酸溶液內48小時，以使其消毒，但要在盛來蘇兒溶液的玻璃簡底部墊一層棉花，以防投入吸管時損破。吸管洗滌時，先浸在2％肥皂水中1～2小時，取出，用清水沖洗以后再用蒸餾水沖洗。
3．載玻片與蓋玻片用過后，可投入2％來蘇兒或5％石炭酸溶液，取出煮沸20分鐘，用清水反復沖洗數(shù)次，浸入95％酒精中備用，再次使用時在火焰上燒去酒精，用此法洗滌和保存的載玻片及蓋玻片清潔透亮、無水滴。若載玻片與蓋玻片滴有香柏油，需先用擦鏡紙拭去或滴加二甲苯搖晃，待油垢溶解后再消毒處理。
各種玻璃器材若用上述方法處理，尚未達到清潔目的，則可將其浸泡于下述清潔液中過夜，取出后用水反復沖洗數(shù)次，最后用蒸餾水沖洗。
附：清潔液的配制方法
重鉻酸鉀  60g  硫酸  60ml
自來水  100ml
此液可連續(xù)使用，直至液體變綠后不再使用。此種清潔液內含有硫酸，腐蝕性很強，使用時應注意對衣服和皮膚的灼損。
凡含油脂如凡士林、石臘等的玻璃器材，應單獨進行消毒及洗滌，以免污染其它的玻璃器皿。這種玻璃器材于未洗刷之前須盡量去油，然后用肥皂水煮沸趁熱洗刷，再用清水反復沖洗數(shù)次，最后用蒸餾水沖洗。
（三）玻璃器皿的干燥 
1．晾干  不急用的，要求一般干燥，可在無塵處倒置晾干水分，待自然干燥?？捎冒灿行蹦踞?shù)募茏雍蛶в型笟饪椎牟ＡЧ穹胖貌Ａ髅蟆?br /> 2．烘干  洗凈的玻璃器皿控去水分，放在電烘箱中烘干，烘箱溫度為105~120℃烘1h左右。亦可放在紅外燈干燥箱中烘干。帶有實心玻璃塞的及厚壁玻璃器皿烘干時要注意慢慢升溫，且溫度不可過高，避免烘裂，量器不可放于烘箱中烘。硬質試管可用酒精燈烘干，要從底部烘起，把試管口向下，以免水珠倒流把試管炸裂，烘到無水珠時，把試管口向上趕凈水汽。
3．熱（冷）風吹干  對于急于干燥的儀器或不適合放入烘箱的較大的玻璃器皿可用吹干的方法，通常用少量乙醇、丙酮（或最后再用乙醚）倒入已控去水分的玻璃器皿中搖洗，隨即控凈溶劑（溶劑用后回收），用電吹風吹，開始用冷風吹1~2min，當大部分溶劑揮發(fā)后吹入熱風至完全干燥，再用冷風吹殘余的蒸汽，使其不再冷凝在容器 內。此法要求通風好，防止中毒，不可接觸明火，以防有機溶劑爆炸。
 
 
 
玻璃器材洗凈后，通常倒置于干燥架上，令其自然干燥，必要時亦可放于干烤箱中50℃左右烤干，以加速其干燥，溫度不宜太高，以免玻璃器皿碎裂。干燥后以干凈的紗布或毛巾拭去干后的水跡，以備作進一步處理應用。
（四）玻璃器皿之包裝  玻璃器皿在消毒之前，須包裝妥當，以免消毒后又為雜菌所污染。
1. 一般玻璃器材（試管、三角瓶、燒杯等）的包裝，用做好適宜大小的棉塞，將試管或三角燒瓶口塞好，外面再用紙張包扎，燒杯可直接用紙張包扎；
2．吸管的包裝用細鐵絲或長針頭塞少許棉花于吸管口端，以免使用時，將病原微生物吸入口中，同時又可濾過從口中吹出的空氣。塞進的棉花大小要適度，太松太緊對其使用都有影響。最后，每個吸管均需用紙分別包卷，有時也可用報紙每5～10支包成一束或裝入金屬簡內進行干烤滅菌；
3．培養(yǎng)皿、青霉素瓶、乳缽等包裝，用無油質的紙將其單個或數(shù)個包成一包，置于金屬盒內或僅包裹瓶口部分直接進行滅菌。
附：棉塞的制作：制作棉塞，最好選擇纖維長的新棉花，絕不能用脫脂棉，其制法視試管或瓶口的大小取適量棉花，分成數(shù)層。互相重疊，使其纖維縱橫交叉，然后，折疊卷緊，用兩層紗布捆系結實，做成長約4～5cm的棉塞。良好的棉塞上下粗細一樣，并且與管口緊接，沒有可見空隙。
（五）玻璃器材的滅菌  玻璃器材干燥包裝后，均置于干熱滅菌器內，調節(jié)溫度至160℃維持1～2小時進行滅菌，滅菌后的玻璃器材，須在1周內用完，過期應重新滅菌，再行使用。必要時，也可將玻璃器材用油紙包裝后，用121℃高壓蒸氣滅菌20～30分鐘。
三、供組織培養(yǎng)用的璃破器皿及其它器皿的清洗、包裝與消毒
（一）清洗  不論新購置的或用過的玻璃器皿，都必須首先浸泡于粗硫酸（有的實驗室用清潔液）中過夜（清潔液的配方是：先將102克重鉻酸鉀與常水100ml相混合，加熱使成飽和溶液，然后按每35ml飽和溶液加粗制濃硫酸1000ml即成），次日取出用自來水浸泡4～6小時后，再用自來水沖洗10次（不得少于10次）或用流水沖洗5分鐘（清潔液浸飽的應適當延長）；最后蒸餾水沖洗6次（雙蒸餾水沖洗3次即可，放入溫箱中干燥即可包裝。
（二）包裝  吸管和移液管首先在管口塞入普通棉花少許（不得過緊或過松），用麻紙包扎后，裝入玻璃簡滅菌；培養(yǎng)瓶在塞好軟木塞后，外面用牛皮紙包扎；平皿分別用牛皮紙包裹；中試管以4～6支用方形牛皮紙包裹在一起，進行滅菌。代用的鏈霉素小瓶，可直接放人鋁飯盒內滅菌。
（三）滅菌  包裝好的玻璃器皿，均以于熱滅菌，100℃維持2～3小時。滅菌過的器皿，必須在一周內用完，過期應重新滅菌。
（四）翻口橡皮塞的準備，一般經肥皂水煮沸20分鐘后，流水沖洗10次，再以蒸餾水沖洗2次后，用雙蒸餾水浸泡于玻璃缸中備用。使用前煮沸消毒15分鐘，亦可取出晾干包裝高壓滅菌滅菌后使用。
四、毛細管的制備
取直徑5mm長約10厘米的中性硬質玻璃，兩端各塞以棉花，包扎滅菌后兩手持管之兩端，將其中段置于噴燈上燒灼，待其赤熱熔化時，即離開火焰，向兩端抽長，即成毛細管。